Популар Постс

Избор Уредника - 2019

ДНА фрагментација сперме: цена и користи теста

Тест на фрагментацију ДНК сперматозоидима методом ТУНЕЛ - тест за откривање оштећења ДНК у сперматозоидима. Анализа помаже да се процени функција плодности и идентификују узроци неплодности и спонтаних побачаја.

Студија се изводи само у комбинацији са студијом ејакулата * (услуга 36.100 Спермограма).

* Ако је спермограм изведен прије 2 дана, можете узети ТУНЕЛ без поновног прегледа ејакулата (сервис 36.100 Спермограма). Побрините се да добијете резултат сперме у лабораторији.

Индикације

  • неплодност нејасне генезе са нормалним спермограмима,
  • супружник који не развија трудноћу,
  • неуспјешним покушајима кориштења асистираних репродуктивних технологија (ИВФ, ИЦСИ, ИМСИ) у повијести,
  • касни очински узраст
Препаратион
Спермограм пролази након сексуалне апстиненције. Препоручени период апстиненције је 2-7 дана. Током периода припреме није дозвољено пити алкохол у било којој количини.

За 7-10 дана потребно је искључити лекове, процедуре са прегрејавањем (УХФ, сауна, купка).

На дан који је претходио анализи, пожељно је искључити тежак физички и психички стрес.

Након масаже, простата треба да траје најмање 3 дана.

Ако су током припремног периода дошло до прехладе или других акутних болести које су праћене порастом температуре, требало би да одбијете спровођење студије.

Услови хватања
Ејакулат се сакупља мастурбацијом у стерилној пластичној посуди. Кориштење кондома није дозвољено.

Да би се добили исправни резултати истраживања, потребно је прикупити сав добивени материјал.

Референтне вредности: садржај сперматозоида са прекидима ДНК није већи од 15%.

Узроци патолошких промена:

  • конгенитални (генетски одређени) поремећаји сперматогенезе (недостатак протамина),
  • излагање штетним факторима (различите врсте зрачења, узимање одређених лекова, систематско узимање алкохола, тровање оловом, тровање живом),
  • хронична упална обољења репродуктивних органа (простатитис, весицулитис),
  • варикоцела,

Етиологија оштећења ДНК

Физиолошки механизам фрагментације (разградње структуре) ДНК није у потпуности разјашњен. Могући узроци недостатака у кључној компоненти мушке гамете су:

  • апоптоза,
  • кварови у ремоделирању кроматина,
  • оксидативни стрес.
  • Бројни спољни фактори могу изазвати интрацелуларне поремећаје:

    1. Инфекције гениталног тракта. Инфекција мушких репродуктивних органа патогеним бактеријама доводи до упале и узрокује повећану производњу белих крвних зрнаца. Овај процес је праћен оксидацијом ДНК ћелија које нарушавају њихов интегритет.
    2. Недостатак регуларних ејакулација. Постоји уобичајена заблуда да ако “спасите семе” и да не ејакулирате, онда ће бити више сперме, што ће повећати шансе за оплодњу. Ово дефинитивно није случај. Са ограниченом ејакулацијом, сперма ће се дуже излагати оксидативном стресу и, као резултат, имати већу количину оштећења ДНК. Боље је ејакулирати свака 2-3 дана како би се сачувала ДНК секвенца.
    3. Прегревање. Није без разлога тестиси смјештени на вањској страни тијела: висока температура не доприноси оптималној производњи сперме. . Нежељена хипертермија може бити узрокована неудобним држањем, збијеном одјећом, неким професионалним активностима (печење, плинско заваривање, автовоздение), топли спа третмани, навика држања лаптопа на крилу. Повећана температура тестиса је уочена код неких болести (неспуштени тестис, варикоцела).
    4. Цаффеиноманиа. Студије су показале да дневна конзумација до 300 мг кофеина (3 или више шољица кафе) је пуна оштећења интегритета ДНК сперме. Како се испоставило, кофеин је снажан инхибитор процеса репарације ДНК.
    5. Употреба дрога и неки лекови. Доказана веза мушке неплодности са употребом марихуане, кокаина, метамфетамина, опиоида, анаболичких стероида. Чак и краткотрајна употреба ових супстанци може довести до смањења квалитета сперме и либида. Хронична употреба лекова повећава шансе оштећења сперме на молекуларном нивоу. У случају овисности о кокаину, резидуални ефекти се могу уочити у року од двије године од посљедње употребе. Значајна опасност за сперматогенезу су фармацеутски препарати који се користе у хемотерапији, у лечењу хипертензије, гихта, повећане киселости желуца, упале уринарног тракта. Група лекова штетних за мушку плодност укључује неке врсте антибиотика, антиконвулзиве, лекове који задржавају течност и метадон.
    6. Злоупотреба дувана и алкохола. Иако су неке студије откриле да неке врсте алкохолних пића (нпр. Црно вино) имају антиоксидативни учинак, доказано је да конзумација два или више чаша алкохола дневно утиче на генетски материјал сперме. Ништа мање деструктивно за ДНК мушких гамета никотина.
    7. Ирационалне дијете. Редовно вежбање треба да помогне у одржавању здраве физичке форме, уместо да ограничава исхрану. Нормална генеза сперме треба адекватно допуњавање нутријената.
    8. Еколошки загађивачи. Еколошки утицај токсичних супстанци као што су диоксин, пестициди, хербициди, узрокује оштећење ДНК сперматозоида. Професионална изложеност металима, бојама, растварачима, средствима за одмашћивање, лепковима на бази воде такође може да деградира квалитет ДНК.
    9. Старост Анализе спермија пацијената после 40 година указују на тренд повећања фрагментације ДНК, као и на повећање генетских мутација и хромозомских абнормалности.
    10. Електромагнетно зрачење. Употреба електронских направа у свакодневном животу, посебно у мобилним телефонима, озбиљна је пријетња репродуктивном систему мушкараца.

    Већина ових фактора ризика доприноси интензивној оксидацији мушких гамета. То доводи до оксидативног стреса - стање када ниво заштитног потенцијала ћелија није довољан да издржи штетне слободне радикале.

    Последице дефеката у генетској компоненти

    Прекиди у ланцима ДНК сперме пуни су озбиљних пријетњи плодности:

  • кршење процеса оплодње,
  • спорији развој бластоциста,
  • погоршање имплантације ембриона,
  • чести побачај.
  • Понекад женска јаја показују способност враћања сперме са фрагментираним ДНК. Међутим, таква "реконструкција" је немогућа са широком сликом фрагментације или ооцита ниског квалитета.

    Сперматолошко испитивање на молекуларном нивоу

    Развој микробиологије и геномике омогућио је развој бројних метода за проучавање молекуларног стања мушких гамета. Сваки лабораторијски тест за фрагментацију ДНК сперме (од следећих) нашао је широку примену у андрологији и репродукцији:

    1. ТУНЕЛ - проучавање сперме под микроскопом помоћу светлосно-оптичког ефекта. Означени нуклеотиди се додају у узорак сперме. Они непогрешиво идентификују места прекида ДНК и удубљују се у њих, због чега се измењене ћелије осећају сјајно. Њихов садржај у ејакулату одређује се бројањем и изражава се у процентима.
    2. СЦД - анализа декондензације (отпуштања) кроматина у ћелијским језграма. Унутар здраве ћелије, ова супстанца је ближе центру нуклеуса и даље у оштећеној ћелији. Ензими се користе као маркери. Захваљујући њима, главе сперме са ДНК разбијају се "осветљавају", тиме визуализујући слику оштећења.
    3. СЦСА је проучавање структуре хроматина помоћу флуоресцентног ДНА маркера. Сперматозоиди обојени њиме пролазе кроз ласерски зрак, који доводи до тога да ћелије сијају у различитим бојама, у зависности од степена оштећења ДНК: зелене - нормалне, жуте - умерених дефеката, црвених - критичних промена.

    Резултат генетске анализе сперме познат је као индекс фрагментације ДНК сперме. Његова гранична вредност код здравог мушкарца је 15-20%.

    Показујући ниво сперматозоида са фрагментираним ДНК, молекуларни тестови омогућавају објективну процену пацијентовог потенцијала за плодност:

  • ≤ 15% - присуство мањег проблема
  • > 16% ≤ 49% - повећана опасност од субфертилности,
  • > 50% - висок ризик од неплодности.
  • Индикације за ДНК тест

    Високотехнолошка генетска анализа гамета је користан извор информација за неке мушке патологије: насљедне (цистичне фиброзе) или стечене (варикоцеле). Међутим, пре свега ДНК тест се прописује током низа неуспеха у лечењу неплодности:

  • спор развој бластоцисте или ембриона,
  • неколико неуспјелих покушаја ИВФ / ИЦСИ
  • понављајућих побачаја са женском партнерицом
  • идиопатска неплодност.
  • Као што пракса показује, међу кандидатима за ДНК тестирање најчешће су мушкарци:

  • старост
  • са незадовољавајућим параметрима сперме (који често корелирају са фрагментацијом ДНК),
  • штетним супстанцама.
  • Начини за подешавање фрагментације ДНК

    У зависности од тога шта је узроковало дисконтинуитет ланаца ДНК, изабрани су поступци за обнављање њиховог интегритета. Терапијски курс се развија индивидуално за сваког пацијента.

    Могуће опције третмана:

  • антибиотска терапија - када се открије инфекција,
  • промена начина живота: избегавање зависности (дрога, пушење, алкохол, кофеин), промена занимања,
  • дијетална терапија - укључивање у исхрану свежих намирница, посебно оних које садрже антиоксиданте и витамине Ц и Е,
  • операција варикоцела,
  • аспирација сперматозоида тестиса за зачеће ин витро (за разлику од оштећења ДНК која се примећује у ејакулату, садржај тестиса не може бити под утицајем физиолошке патологије),
  • антиоксидантна терапија.
  • С обзиром да се репродукција нове сперме одвија периодично (једном у кварталу), могуће је проценити ефикасност терапијског курса само 3 месеца након почетка лечења.

    Закључак

    Очевски допринос оплодњи, развоју ембрија и настанку здравог потомства је од фундаменталног значаја. Стога, да би се спровела функција плодности, неким пацијентима се препоручује да се подвргну испитивању сперме на нивоу ДНК.

    Молекуларно тестирање може пружити вриједне информације о статусу гамета човјека. Главно је да се овом важном дијагностичком средству и накнадном третману повери професионални лекар.

    Индикације за анализу

    Да би се идентификовао прекид ланца ДНК сперме, спроводи се посебан тест. Спермограм у овом случају није информативан. Показује само концентрацију сперматозоида у ејакулату, њихову активност. Приказан је тест фрагментације:

    • са мушком неплодношћу, ако нема других фактора који је провоцирају,
    • ако покушаји вештачке оплодње нису успели,
    • понављајући побачај
    • ако је ембрион лошег квалитета,
    • мушкарци старости 45 година,
    • након криопрезервације узорка сперме пре ИВФ (ин витро оплодња),
    • са проширеним венама сперматног врпце,
    • ако је у року од три месеца дошло до повећане телесне температуре.

    Такође, процедура мора бити подвргнута мушкарцима који раде у условима високих опасности.

    Како се врши анализа?

    Да би се проверио интегритет ДНК сперме врши се тунел-тест, који укључује микроскопско испитивање сперме. Пацијент мора узети узорак сперме у посебном стерилном контејнеру са поклопцем. Важно је! Кондом није погодан за ову сврху, јер компоненте које садржи може имати негативан утицај на покретљивост сперме. Такође, приликом транспорта контејнера са генетским материјалом, потребно је посматрати температурни режим, који чини температурни опсег од +27 до +37 степени Целзијуса.

    Да би се добио тачан резултат, анализа се мора обавити у року од једног сата од узимања узорка. За то, техничар додаје реагенс у ејакулат. Он, реагујући са сјеменом текућином, пуни ломове ДНА флуоресцентним нуклеотидом, чинећи фрагментиране сперматозоиде видљивима. Лабораторијски асистент врши њихову калкулацију, која је назначена као проценат.

    Да би се добила комплетна слика, паралелно се изводе електронско микроскопско испитивање и спермограм.

    ТУНЕЛ тест припрема

    Да би тест био што прецизнији, потребно је узети 2-7 дана прије узимања узорка: уздржати се од сексуалног односа, узимати лијекове, посјетити купке. Важно је пратити дијету, избјегавати алкохол, не пушити. Пре сакупљања сперме, уреа се мора ослободити.

    Приликом понављања анализе, препоручује се да се посматра редослед и трајање припремних активности, јер то може утицати на резултат.

    Дешифровање

    Након анализе, резултат је дат са тестним индексом и снимком на којем су забележени фрагментисани сперматозоиди. Индекс је однос између оштећеног и здравог генетског материјала који се може оплодити. Нормално, индикатор не би требао бити већи од 15%. Ово сугерише да је сперма са сломљеним ланцем ДНК мања него здрава, тако да је репродуктивно здравље човека у реду и да постоји велика вероватноћа природног зачећа.

    Када је индекс изнад 15%, али испод 30%, могућност оплодње јаја природно остаје, али то може потрајати дуго.

    Ако је број оштећених сперматозоида у ејакулату 30-50%, стручњаци вјерују да је трудноћа природно мало вјероватна, стога се препоручује ИВФ (ин-витро оплодња), интраутерина инсеминација (техника репродукције, која укључује увођење здравих, унапријед одабраних спермија у цервикални канал). ИЦСИ. Дакле, са индексом више од 30%, лекари плодности препоручују ИВФ. Ако је фрагментирани генетски материјал 50% или више, ин витро оплодња је неефикасна. Препоручује се примена интрацитоплазматске ињекције сперме (ИЦСИ). Са индексом од 60% или више, шансе за успешну оплодњу су минималне. ИЦСИ се изводи или се узима донорска сперма.

    До недавно, није било могуће идентификовати оштећене сперматозоиде, а камоли га третирати. Данас је овај проблем могуће третирати. Увођење иновативних медицинских техника омогућава вам успјешно враћање фрагментиране ДНК сперме.

    Да би се то постигло, неопходно је елиминисати или ограничити утицај фактора који изазивају мушку неплодност: прекомерну тежину, штетне навике (пушење, алкохол), излагање токсичним, хемијским супстанцама (рад у опасним индустријама). Друга фаза је свеобухватна дијагноза, елиминација различитих упалних процеса у телу, укључујући и болести мушког репродуктивног система. Паралелно са третманом антибактеријским, анти-инфламаторним лековима (ако је потребно). Витамински комплекси, антиоксиданси морају бити додељени да обнове здравље мушкараца и промовишу формирање здраве сперме.

    Трајање третмана може бити 3-6 месеци. Понекад вам треба више. Ако је терапија била неефикасна, а број здравих сперматозоида не прелази 20-30%, лекари пружају ИЦСИ услугу пару. Тако су стручњаци за репродукцију вештачки одабрали здрави, оплодиви генетски материјал из ејакулата. Онда је посађена у јаје жене.

    У случају великог броја сперматозоида са фрагментираним ДНК, операција се такође изводи како би се извукли директно из тестиса. То је због чињенице да током ејакулације повећава проценат оштећених ћелија.

    Трошкови анализе за фрагментацију ДНК:

    Оштећење ДНК сперме повезано је са параметрима сперме: смањењем концентрације, покретљивости и пропорције нормалних ћелија сперме. У исто време, у 10-20% случајева, могу се јавити са “нормозооспермијом”.

    Главни узрок оштећења ДНК је оксидативни стрес спермеузроковане прекомјерном производњом реактивних врста кисеоника (види слику Аиткен РЈ ет ал., 2014).

    Други разлог је непотпуна апоптоза сперматозоида, повезана са ослабљеном сперматозоидом и сперматогенезом, и / или елиминацијом дефектних облика у епидидимису.

    БиАиткен РЈ ет ал. // Асиан Ј Андрол.2014, 16 (1): 31.

    Оштећење ДНК сперме је мултифакторски процес који зависи и од генетске предиспозиције и од спољашњих фактора штетности (пушење, прегревање, токсичне супстанце, итд.).

    Пошто ово може имати више узрока, процена фрагментације, оксидативног стреса и поремећаја кондензације хроматина (паковање) се посебно препоручује за:

    парови са побачајима,

    парови са необјашњивом неплодношћу дуже од 6 месеци,

    мушкарци старији од 40 година

    пацијенти са варикокеле,

    пациентов с системными заболеваниями (диабет, ожирение и др.),

    мужчин с вредными факторами образа жизни (курение, ионизирующее излучение, токсические вещества, перегревание, в т.ч. при использовании облегающей одежды, несбалансированное питание и др.),

    мужчин с историей рака и химиотерапией,

    мужчин, проходящих лечение некоторыми рецептурными препаратами,

    у мужчин, перенесших урогенитальные инфекции,

    плохом качестве эмбриона во время повторных циклов донорства яйцеклеток,

    мужском идиопатическом бесплодии.

    Для обнаружений повреждений ДНК в сперматозоидах используют различные методы: дисперсии хроматина в агарозном геле (SCD), электрофореза ДНК после денатурации (COMET), терминальной метки (TUNEL) и др.

    У табели смо сумирали принципе и тумачења најчешће коришћених тестова.

    Димензије резултата

    Метода ТдТ-посредоване етикете дУТП-краја руптуре ДНК ланца (ТУНЕЛ метода)

    Мери степен оштећења ДНК уметањем ДНК пробе (модификованог нуклеотида) у место оштећења ДНК.

    Удео сперматозоида са оштећењем ДНК, који су модификовани нуклеотиди, уграђени су у ДНА јаз

    Анализа структуре хроматина сперме (СЦСА метода)

    Мерење осетљивости ДНК на денатурацију

    Број сперматозоида са фрагментираним ДНК у%

    Анализа дисперзије хроматина сперме (СЦД метода)

    Мерење осетљивости ДНК на денатурацију

    Број сперме са фрагментираним ДНК,%

    ДНК комет тест (ЦОМЕТ)

    Мерење осетљивости ДНК на денатурацију

    Степен фрагментације ДНК у једној јединој спермији процењује се процентом ДНК у репу комете, дужини репа и интензитету боје.

    Бојење анилин плавом и хромомицином А3

    Мерење нивоа збијања хроматина сперматозоида на основу односа хистон-протамин

    Број сперматозоида са ниским сабијањем хроматина,%

    Индекс Г0 + Г1 + Г2к2 мањи од 40

    Историјски гледано, прије више од 35 година, СЦСА метода је кориштена за процјену фрагментације ДНА. За научне сврхе, најчешће се користи ТУНЕЛ, који може детектовати и једноланчане прекиде и дволанчане прекиде ДНК. Најсавременији и најпогоднији за клиничку употребу је СЦД метод, неки га сматрају и најосетљивијим.

    Кондензација (паковање) хроматина сперматозоида се процењује односом хистонских и протаминских протеина у сперматозоидима, за које се користи анилин плаво и хромомицин А3 бојење.

    Оригиналне фотографије из наше лабораторије:

    А- ТУНЕЛ, Б-СЦД, Б-хистони / Протамини

    Детекција повећане фрагментације ДНК сперматозоида захтева третман који има за циљ елиминацију сумњивог патогенетског фактора: инфективних инфламаторних процеса, па чак и асимптоматског преноса таквих инфекција као што су Цхламидиа трацхоматис, Мицопласма сп., Уреапласмауреалитицум, неки Е. цоли серотипови итд. укључујући и варикокеле), пушење, деловање одређених лекова (пароксетин, милоксан, пентоксифилин, итд.), прекомерна тежина, метаболизам угљених хидрата, итд. У случају откривања оксидативног стреса - додатак Нема сврхе различитих хранљивих материја, антиоксиданата. У најтежим случајевима може бити корисно добити сперматозоиде директно из тестиса, гдје су заштићени од дјеловања активних радикала. хемато-тестикуларна баријера. Али у овом случају, каснији пропусти ИВФ ИЦСИ могу бити повезани са кршењем паковања хроматина, јер се замена хистона са протаминима неопходним за потпуно сазревање сперматозоида јавља већ у епидидимису.

    У последњих неколико година, модерне ћелијске технологије су се веома ефикасно користиле за нормализацију структуре хроматина сперме, укључујући повезано са употребом МСЦ и Сертоли ћелија.

    Др. мед. Науке, професор В.А. Бозхедомов

    Неколико цитата о значају фрагментације ДНК сперме:

    “... У сперматозоидима код мушкараца са олигозооспермијом, повећава се оштећење ДНК. Ово повећање је повезано са смањењем шансе за природну трудноћу и повећањем вјероватноће раног губитка трудноће ... "

    Мушка неплодност / А. Јунгвиртх (председавајући) и др. ©

    Европска асоцијација за урологију, 2017: 14.

    “... Постоје два типа фрагментације ДНК сперме, од којих један зависи од параметара спермограма, а други не. "

    Муратори М. и др. / Хум. Репрод., 2008, В23 (5), стр.

    “... Неисправни сперматозоиди који садрже оштећену ДНК, задржавају способност оплодње. Међутим, неки фенотипови неплодности су повезани са таквим оштећењем ДНК, на пример, необјашњеном и идиопатском неплодношћу, поновљеним неуспјешним ВМИ и ИВФ-ом и уобичајеним побачајима. Штавише, већи ризик од рака и дефеката преноса у потомству је повезан са оштећењем ДНК сперме ... "

    А. Зини, А. Агарвал (ур.), 2011, Спрингер, 512. Сперм хроматин: биолошка и клиничка примена код мушке неплодности и асистиране репродукције.

    "... Од многих разлога за које се тренутно мисли да узрокују дисфункцију сперматозоида, оштећење нуклеарне ДНК је највише проучавано и све више препознато као кључни фактор који утиче на квалитет ембриона, његов развој и имплантацију ..."

    Маллидис Ц. ет ал. // Хум Репрод., 2010, В.26, Н7, П.1641-1649

    “... Сперматозоиди са фрагментираном ДНК могу оплодити зреле ооците, али активација генома очева може пореметити ембрионални развој, што доводи до преимплантацијских и постимплантацијских губитака. Овај тип оштећења може се појавити код ембриона са нормалним кромосомским комплементом и може објаснити зашто неки нормални кариотипни ембриони нису у стању да обезбеде трудноћу код пацијената са необјашњивим побачајима. Уопштено, што се степен оштећења ДНК преноси на ембрион патерналним геномом, то ће се брже манифестовати током развоја ембриона ... "

    Барех Гихан М. ет ал. // Фертилити анд Стерилити, 2016, 105 (2): 15-282

    “... Недавне студије су показале важност интегритета ДНК сперме као важног фактора који утиче на функционалну компетенцију сперме. Стога, детекција фрагментације ДНК сперме може бити клинички корисна као део процеса процене плодности ... Тестови фрагментације ДНК сперме практично немају разлику у предвиђеној вредности између ИВФ и ИЦСИ ... "

    Циссен М ет ал. Мјерење фрагментације ДНК сперме и клиничких исхода: Систематски преглед и Мета-анализа. ПЛоС Оне. 2016 Нов 10, 11 (11): е0165125.

    “... Постојећи животињски модели и подаци о екстраполацији у људским истраживањима изазивају забринутост због здравствених проблема код потомства добивених из сперме са повећаним нивоом фрагментације ДНА. "

    Бацх ПВ, Сцхлегел ПН. Оштећење ДНК сперме и ИВСИ и ИЦСИ. Басиц Цлин Андрол. 2016, 5 (26): 15.

    „... Јединствени процес збијања хроматина у сперматозоидима има важне импликације за развој тестова скрининга неплодности код мушкараца и за разумевање карактеристика хроматина сперме, што може утицати на резултате асистираних репродуктивних технологија. "

    Палермо ГД ет ал. Перспективе процене интегритета хроматина људске сперме. Фертил Стерил. 2014 Дец, 102 (6): 1508-17.

    “…Мета-анализа са дводимензионалним случајним ефектом дала је АУЦ (површина испод криве) од 0,92 са осетљивошћу (95% интервал поузданости) од 0,80 (0,78–0,82) и специфичности 0,83 (0,80–0, 86) да се користи СДФ тест у разликовању неплодних мушкараца од нормалне контроле плодности. Штавише, анализа подгрупа је показала да је СДФ анализа са једним ТУНЕЛ тестом резултирала АУЦ од 0.9506 са комбинованом осетљивошћу од 0.77 (0.74–0.8) и специфичношћу 0.91 (0.87–0.94), док су СЦД и Цомет тестови показали комбиновану осетљивост од 0, 77 (0,67-0,81) или 0,91 (0,88-0,94) и специфичност 0,84 (0,75-0,91) или 0,63 (0,54-0.70) уз АУЦ од 0,84 или 0,94 ... "

    Цуи ЗЛ ет ал. Дијагностичке тачности ТУНЕЛ-а, СЦД-а и анализа фрагментације ДНК на бази комета за мушку неплодност: Мета-анализа. Цлин Лаб. 2015, 61 (5-6): 525-35.

    Шта је ХАЛО тест за процену фрагментације ДНК?

    У лабораторији СПЕРМА-ТЕСТ.ру, индекс фрагментације ДНК се одређује методом ХАЛО (ХАЛОСПЕРМ).

    За разлику од других метода анализе фрагментације ДНК сперматозоида, ХАЛО метода детектује и „наглашава“ не оштећену, већ читаву ДНК. Хало се формира око "здравих" спермија са интактном ДНК, која је јасно видљива на оптичком микроскопу. Таквих ореола нема код мушкараца са оштећеном ДНК.

    Анализа индекса фрагментације ДНК сперматозоида врши се 30-60 минута након разблаживања ејакулата. У анализи је процењено од 200 до 500 сперматозоида са реповима.

    Доступност: 1-3 радних дана

    Тест за фрагментацију ДНК сперме: фотографија из микроскопа

    Сперматозоиде са интактном ДНК молекулом имају јасан велики хало. Сперматозоиди са фрагментацијом ДНК (ломови) немају такав хало или нису јасни.

    ХАЛО тест се заснива на СЦД методи (патентирана од стране Халотецх-а). До данас, ова метода се активно користи у клиничкој пракси и укључена је у многа клиничка испитивања. ХАЛО се сматра осјетљивијим тестом у односу на друге.

    Референтна вредност (норма) за овај тест је 20% и ниже.

    То значи да сперма са фрагментацијом ДНК мора бити мања од 20% од укупног броја.

    Како се изводи ХАЛО тест?


    Лабораторијски асистент сједињује сперму са специјалним реагенсом, чиме започиње процес денатурације ДНК и затим бојење. Ако ДНК сперме није оштећен (не фрагментиран), око густог централног ДНК језгра се формира јасан "хало". Ако је ДНК сперме фрагментирана, онда не постоји ореол, чак и ако се манифестује, веома је танак и нејасан. То се јасно види под микроскопом када сперматолог-ембриолог открије сперму са фрагментираним ДНК. Резултат израчунавања је изражен у процентима, и обично не би требао бити већи од 20%.

    За потпуност тестирања, спермограм и ЕМИС (електронско микроскопско испитивање сперме) се обично изводе паралелно са анализом фрагментације ДНК. Ако су направљени раније, али не пре више од 3 месеца, покажите их свом лекару за консултације. Све три анализе могу се извести из једне порције сперме.

    Како се припремити за студију?

    Припрема подразумева апстиненцију од 2 до 5 дана.

    Метода сакупљања ејакулата - мастурбација.

    Контејнер за сакупљање ејакулата - стерилни контејнер (бесплатно код лабораторијског администратора)

    Непосредно пре сакупљања материјала потребно је испразнити садржај бешике и опрати гениталије.

    Ако се тест проводи више пута, трајање апстиненције увијек мора бити исто. Ово је важно за поређење резултата током времена.

    Ако се узорак прикупља код куће, курир мора бити транспортован у лабораторију у термалној кутији.

    Резултат теста ХАЛО и његова дешифровања

    Након студије, формира се ХАЛО тестни протокол, где се показује индекс фрагментације ДНК.

    У наставку су дате опције за резултате и препоруке за тактику лијечења. Ове препоруке се заснивају на истраживању које су спровеле праве научне групе у протеклих 10 година. Ово је вриједно истраживачко искуство, али то су само препоруке. Интерпретирајте резултате свог лекара и на основу историје болести да бисте понудили опције лечења.

    Шта показује индекс ДНА фрагментације? Он одражава процентуални однос између “здравих” сперматозоида и сперматозоида са празнинама у ДНК ланцима.

    Ако је резултат ХАЛО изнад 50%, препоручује се кориштење ИЦСИ технологије. Са таквим резултатима, ИЦСИ ће бити ефикаснији од ИВФ-а.

    Ако је резултат изнад 60%, шансе за трудноћу чак и уз помоћ асистираних репродуктивних технологија су изузетно ниске. Боље је користити донорску сперму.

    Ако је индекс фрагментације ДНК сперме 50% или више, трудноћа је мало вјероватна, чак и када се користе репродуктивне технологије.

    Када добијете резултат ХАЛО теста, свакако контактирајте андролога за помоћ.

    Фрагментација ДНК сперме - узрок неплодности

    Један од узрока мушке неплодности је оштећење (фрагментација) ланца ДНК који се налази у језгру главе сперме. У овом молекулу нуклеинске киселине се кодира и чува сва генетска информација, која се зачеће преноси детету. И што је више таквих прекида у молекули ДНК, мања је вероватноћа оплодње јајашца од стране сперматозоида.

    Фрагментација ДНК: шта показује спермограм?

    Спермограм - златни стандард примарне процене квалитета сперме. Стандарди сперме нису ревидирани од 2010. године. Увођењем Кругерове морфолошке процене, ова анализа је достигла максималну дијагностичку вредност. Међутим, до сада спермограм не може објаснити ни половину случајева мушке неплодности. Стога су специјалисти за плодност морали тражити друге, дубље и специфичније методе истраживања.

    Немогуће је дијагностицирати ломове ДНК током спермограма. Сперматозое са оштећеном ДНК обично одржавају добру покретљивост. Понекад су чак способни за оплодњу, али трудноћа која слиједи престаје или се прекида у раним фазама.

    У протеклих 10 година, наука је потврдила да је оштећење ДНК сперме директно повезано са оштећењем оплодње, кашњењем у развоју ембрија, слабом имплантацијом и побачајима. Ие са свим потешкоћама почетка и почетка трудноће.

    Имам добру сперму. Није откривена проспермија. Зашто морам да анализирам фрагментацију сперме?
    Истраживања у 2016. години показала су да 10% мушкараца са нормалним читањем сперме има висок индекс фрагментације ДНК сперме и да су у категорији пацијената са идиопатском неплодношћу (тј. Неплодност из непознатих разлога). Према томе, вероватно је да имате сличан случај. А онда ће ваша сперма са нормалном покретљивошћу и морфологијом повећати шансе за успешну трудноћу.

    Коме је прописано тестирање фрагментације ДНА?

    Индикације за прописивање тестова за фрагментацију ДНК:

    • идиопатска (необјашњена) мушка неплодност
    • пропуштени абортус (одложени развој ембриона)
    • ЕЦО ИЦСИ
    • понављајући побачај
    • варицоцеле
    • мушкарци имају 45 или више година

    Поред тога, тест ДНА фрагментације се спроводи пре замрзавања донорске сперме да би се проценио њен квалитет и током припреме за ИВФ (ин витро оплодња) или ИЦСИ (интрацитоплазматска ињекција сперме).

    Анализа фрагментације ДНК и АРТ (ИВФ, ИЦСИ)

    Анализа фрагментације ДНК помаже да се одреди који ће од метода потпомогнуте репродуктивне технологије (АРТ) помоћи одређеном пару. На пример, интраутерина инсеминација (ИУИ) и екстракорпорална оплодња ће помоћи паровима са ниским и средњим оштећењем ДНК код мушкарца. Парови са високим нивоом оштећења ДНК ће помоћи ИЦСИ.

    Једина група парова за коју анализа ДНА оштећења није од користи је она у којој је код мушкарца дијагностикована и потврђена олигоастенотерозооспермија (тј. 3 проспермије одједном). Само ИЦСИ може помоћи таквим паровима и искусни андролог може одмах то рећи.

    Анализа фрагментације ДНК је неопходна за парове са идиопатском мушком неплодношћу. Ие када се дијагнозом утврди да је разлог у мушкарцу, међутим, он не може објаснити разлог, поставити дијагнозу и прописати лијечење. За пар са идиопатском мушком неплодношћу, фрагментација ДНК ће помоћи да се уштеди време без трошења на неуспешне покушаје ИВФ-а, неефикасне режиме лечења и опште јачање тела. Не губите време на празно узбуђење, очај и празно чекање.

    Зашто је ДНК сперме фрагментиран?

    Један од најистакнутијих механизама оштећења ДНК ланаца је деловање слободних радикала (реактивне врсте кисеоника). Они оксидирају ДНК молекул, узрокујући оштећење.

    Да појаснимо: Сви мушкарци имају слободне радикале и оштећења ДНК. Али обично нема много таквих штета, али слободни радикали морају одолети антиоксидантима.
    Антиоксиданти штите сперматозоиде апсорбујући слободне радикале. Богати су семенском плазмом - течност у којој сперматозоиди „лебде“.

    Да би се утврдило колико од ових потенцијално опасних слободних радикала у сперми човека, извршити Студију реактивних форми кисеоника у нативном ејакулату (РОС) (тј. Као што је то) или Студија реактивних облика кисеоника у опраној спермији (РОС), испирање сперме из семена плазма Какав тест треба да се спроведе - доктор може да каже.

    Да би се утврдило колико се антиоксиданти одупиру слободним радикалима, анализирати антиоксидацијску активност сјемене плазме.

    1. Спољни фактори:

    • зрачења и токсичних хемикалија
    • претходне инфекције, укључујући полно преносиве инфекције,
    • неповољне климатске и еколошке услове у области боравка,
    • стрес и нездрава исхрана
    • пушење, злоупотреба алкохола,
    • варикоцела,
    • старост мушкарца старог 40-45 година
    • хроничне болести урогениталног тракта,
    • хемотерапија
    • генетска предиспозиција.

    2. Интерни фактори:

    • непотпуно сазревање мушких репродуктивних ћелија,
    • нормално, само мушко тело одбацује већину сперме лошег квалитета, а само неколико њих улази у ејакулат. Ако из неког разлога дође до квара у раду система одбацивања, у сперми има много више „болесних“ заметних ћелија. Квалитет ејакулације не пати од тога, али се смањује вјероватноћа успјешне оплодње.

    Постоје подаци из студија које потврђују да женско јаје оплођено сперматозоидом са фрагментираном ДНК може "излијечити" и обновити оштећену генетску структуру. Али успјех таквог "третмана" одређује се, прије свега, биолошком доби и здравственим стањем жене. Само млада јаја, која имају висок потенцијал за поправку ДНК сперматозоида, могу да елиминишу такав дефект. Поред тога, од великог значаја је степен уништења и природа оштећења генетских структура.

    Тестови фрагментације ДНК сперме: ХАЛО или ТУНЕЛ?


    Индекс фрагментације, за разлику од спермограма, показује повреде интегритета ДНК ланаца. Оштећена ДНК често може бити код мушкараца са добрим резултатима сперме. Потому что сама молекула ДНК никак не влияет на основные параметры, тестируемые при анализе спермограмма: морфология, подвижность, количество сперматозоидов.

    Как только была обнаружена значимая взаимосвязь фрагментации ДНК с проблемами на ранних сроках беременности, начался настоящий бум в разработке методик. Новые методы анализа и исследований фрагментации ДНК появляются каждый год. Все они проходят клинические исследования, доказывают свою диагностическую значимость. В лаборатории SPERMA-TEST.ru определение Индекса Фрагментации ДНК проводится методом HALO (HALOSPERM).

    Что такое TUNEL-тест?

    Тунел-тест је микроскопски преглед сперме, чији је циљ да открије сперму са оштећеном ДНК и преброји њихов број.

    Метода омогућава процену обима оштећења ДНК у сперми. Сперма се меша са посебним реагенсом. Почиње ензиматску реакцију. Преломи ланаца ДНК сперме испуњени су флуоресцентно обележеним нуклеотидом. Ово се види под микроскопом када спермолог пронађе сперму са фрагментираним ДНК.

    Пре 2-3 године, ТУНЕЛ тест је коришћен свуда. Међутим, то је био дуг и напоран тест. Сада се ХАЛО тест сматра осјетљивијим и информативним, што потврђују клиничке студије. И рок у односу на ТУНЕЛ је смањен за 5-7 пута. Због тога га у нашој лабораторији користимо.

    ХАЛО тест је потпуна алтернатива ТУНЕЛ тесту. Нови тест је бржи и ефикаснији. Стога препоручујемо да га користите.

    Проћи анализу фрагментације ДНК (ХАЛО): адреса, цијена, термини лабораторије.

    ХАЛО тест је студија која се најбоље изводи у специјализованој лабораторији, где раде сперматолози и ембриолози, а не обични лабораторијски техничари, поштују се међународни стандарди за истраживање и принципи медицине засноване на доказима. Андролози и стручњаци за плодност не вјерују резултатима лабораторија мреже.

    Можете узети сперму за ХАЛО тест у лабораторији за сперматологију Сперма-тест.ру.
    ХАЛО тест цост (алтернативе то ТУНЕЛ) - 6900 п.
    Адреса лабораторије у којој можете узети анализу:

    Мосцов, 2нд Козхукховски пассаге, 12, п.14, МК ЕЦО "Кармента"

    Можете заказати термин и поставити питање путем телефона: +7 (495) 787-79-30.

    Поступак за проучавање фрагментације ДНК у сперми

    Човек даје ејакулат, настали материјал се ставља у посебан састав, а затим се станице анализирају под снажном оптичком опремом и сперматозоиди се броје са и без фрагментације ДНК.

    Истраживање показатеља здравих мушкараца способних за оплодњу - мање од 15% сперматозоида са смањеним интегритетом ДНК, у случају мушке неплодности, број патолошких спермија у ејакулату прелази 30%. У овом случају, вероватноћа трудноће без примене ИВФ ИЦСИ методе и њених модификација је изузетно ниска, а повећава се и вероватноћа неплодне трудноће.

    Индикације за проучавање нивоа фрагментације ДНК сперме

    • Неплодност упарена
    • Варицоцеле,
    • Уобичајени побачај,
    • Неуспели покушаји ИВФ-а,
    • Одступања у сперми,
    • Припрема за употребу асистираних репродуктивних технологија (ИВФ, ИЦСИ),
    • Хроничне упалне болести мокраћног система.

    Мушка неплодност је немогућност мушкарца да оплоди жену, одсуство жељене трудноће у пару током редовних покушаја зачећа током једне године. Ако је старост будуће мајке старија од 35 година, одсуство трудноће током редовног сексуалног живота без употребе контрацептивних метода дуже од 6 мјесеци може се дијагностицирати као неплодност.

    Ако се не догоди трудноћа у Вашем пару, вреди се обратити специјалисту - андрологу и проћи кроз комплекс истраживања. Проучавање фрагментације ДНК у сперматозоидима је обавезна компонента прегледа код повреде мушке плодности код мајке и детета. Испит укључује:

    • Примарни преглед андролога,
    • Преглед спермија: спермограм, МАР-тест, електронско микроскопско испитивање сперме (ЕМИС), истраживање фрагментације ДНК у сперми,
    • Хормонско испитивање: тест крви на ниво хормона штитне жлезде, полних хормона и хормона "стрес" - пролактин,
    • Генетско испитивање: кариотипирање, истраживање мутације у ЦФТР гену (ген цистичне фиброзе), АЗФ-локус студија у И хромозому,
    • Ултразвучни преглед (ултразвук): скротум, простата, допплерометрија (изводи андролог).

    На основу резултата дијагнозе, креира се индивидуални програм третмана. Сваки програм за лечење мушке неплодности у „Мајци и детету“ је створен интеракцијом лекара разних специјализација под вођством андролога и специјалиста за репродукцију. Колективни приступ нам омогућава да постигнемо најбоље резултате у избору тактике лијечења и постизању трудноће у пару.

    Погледајте видео: Do Cell Phones Lower Sperm Counts? (Август 2019).

    Loading...